基因擴(kuò)增儀性能能滿足不同工作環(huán)境的多種需求?？捎米饕跃酆厦告?zhǔn)椒磻?yīng)為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。基因擴(kuò)增儀廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域。
基因擴(kuò)增儀的工作原理：
1、基因擴(kuò)增的基本要素
基因擴(kuò)增的基本要素與DNA復(fù)制的基本要素是一致的。
①DNA模板：待拷貝的DNA稱為模板，它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA，Z后擴(kuò)增得到的產(chǎn)物是雙鏈狀態(tài)的。
?、谝铮菏荄NA復(fù)制的先鋒，就象結(jié)晶過程中的晶核，引導(dǎo)DNA的合成。在PCR擴(kuò)增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
③DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)：是DNA復(fù)制的動力，在dNTP等底物存在時在引物的引導(dǎo)下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
④緩沖液：提供DNA合成反應(yīng)所需的pH，離子強(qiáng)度等環(huán)境。
?、?種單核苷酸：dNTP，提供DNA合成原料。
2、基因擴(kuò)增儀原理
基因擴(kuò)增儀是利用PCR技術(shù)對特定基因做體外的大量合成，用于以檢測DNA/RNA為目的的各種基因分析。
PCR反應(yīng)一般設(shè)置20~40次循環(huán)，每一循環(huán)包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應(yīng)。每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個循環(huán)的模板。PCR的擴(kuò)增效率很高，如果循環(huán)次數(shù)是30次，那么新生DNA片段理論上達(dá)到230拷貝(約為109個分子)。PCR反應(yīng)每個循環(huán)的三個基本反應(yīng)步驟如下：
?、倌０錎NA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA產(chǎn)物解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;
③引物的延伸：溫度升到7。
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