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對于凝膠成像分析使用情況報告說明
  • 發(fā)布日期:2017-05-09     信息來源:      瀏覽次數(shù):2073
    •      凝膠成像分析用于對電泳凝膠圖像的分析研究,采用數(shù)字攝像頭將置于暗箱內(nèi)的電泳凝膠在紫外光或白光照射下的影像取進計算機,通過相應的凝膠分析軟件,可一次性完成DNA、RNA、蛋白凝膠、薄層層析板等圖像的分析,凝膠成像分析zui終可得到凝膠條帶的峰值、分子量或堿基對數(shù)、面積、高度、位置、體積或樣品總量。

          總體上來說凝膠成像分析可應用于:凝膠成像系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。
          凝膠成像分析系統(tǒng)是帶暗箱的分析儀,由紫外透射燈箱、白光燈箱、暗箱、攝像頭、計算機系統(tǒng),凝膠分析軟件等組成,可在明室中操作。該儀器配備白光光源及三種波長的紫外光源,您可根據(jù)自己的需要,單獨使用其中某個波長的光源,亦可同時使用幾種波長光源。
          對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。
          一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。
          凝膠成像分析在分子生物學和生物工程研究中,zui常用到的是對蛋白表達產(chǎn)物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統(tǒng)的方法是利用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現(xiàn)在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。
          PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數(shù)。就此功能而言,凝膠成像分析與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數(shù),密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

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